Η συλλογή και κρυοσυντήρηση δειγμάτων σπέρματος μπορεί να πραγματοποιηθεί το συντομότερο δυνατό. Αν και η παραγωγή σπέρματος στους όρχεις είναι συνεχής, απαιτείται ένα χρονικό διάστημα προκειμένου να αναπληρωθεί η ποσότητά του μετά από κάθε εκσπερμάτιση. Για να επιτευχθεί η ανάκτηση της μέγιστης δυνατής ποσότητας σπέρματος, το δείγμα πρέπει να συλλεχθεί μετά από 48 ώρες αποχής από εκσπερμάτιση.

Συνήθως συνιστάται η κρυοσυντήρηση πολλαπλών δειγμάτων τα οποία θα συλλέγονται με αποχή 2 εως 4 ημερών.